Você conhece o Elisa (Ensaio de Imunoabsorção Enzimática)?

Autoria: Equipe Biomedinar


O Ensaio de Imunoabsorção Enzimática (ELISA), amplamente empregada em laboratórios clínicos, desempenha um papel crucial na detecção e quantificação de biomoléculas, destacando-se por sua sensibilidade e especificidade. 
Existem diversos tipos de ELISA, cada um adaptado para analisar diferentes alvos.

ELISA Direto:
Procedimento:
Receptores (anticorpos) são adsorvidos diretamente na placa.
Amostra é aplicada, seguida por um conjugado marcado.
A reação é revelada e quantificada.
Exemplo:
Detecção de antígenos virais diretos em soros.

ELISA Indireto:
Procedimento:
O antígeno é adsorvido na placa.
Após a aplicação da amostra, um anticorpo secundário marcado é introduzido.
A reação é revelada e quantificada.
Exemplo:
Identificação de anticorpos específicos em soros, como em testes de HIV.

ELISA Sanduíche:
Procedimento:
O primeiro anticorpo é adsorvido na placa.
Amostra é aplicada, capturando o antígeno.
Um segundo anticorpo marcado, específico para outra região do antígeno, é introduzido.
A reação é revelada e quantificada.
Exemplo:
Medição de níveis de biomarcadores, como troponina cardíaca.

ELISA Competitivo:
Procedimento:
Antígeno é adsorvido na placa.
Amostra e antígeno marcado competem pelo mesmo sítio de ligação.
A reação é revelada e quantificada.
Exemplo:
Drogas terapêuticas, onde a competição é entre o fármaco e um análogo marcado.

O ELISA supera essas as técnicas anteriormente usadas em termos de sensibilidade, especificidade e facilidade de automação. 
Algumas razões pelas quais o ELISA é preferido incluem:
Sensibilidade: 
Detecta concentrações extremamente baixas de antígenos ou anticorpos.
Especificidade: 
Pode diferenciar entre variantes específicas de antígenos ou anticorpos.
Quantificação: 
Permite a quantificação precisa das substâncias-alvo.
Automação: 
Processos automatizados aumentam a eficiência e reduzem erros.

Essas vantagens tornam o ELISA uma escolha mais versátil e eficaz em ambientes laboratoriais, contribuindo para resultados mais confiáveis e rápidos.

Referências:

Tabatabaei MS, Ahmed M. Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA). Methods Mol Biol. 2022;2508:115-134. doi: 10.1007/978-1-0716-2376-3_10. PMID: 35737237.

Aydin S. A short history, principles, and types of ELISA, and our laboratory experience with peptide/protein analyses using ELISA. Peptides. 2015 Oct;72:4-15. doi: 10.1016/j.peptides.2015.04.012. Epub 2015 Apr 20. PMID: 25908411.

Lin AV. Direct ELISA. Methods Mol Biol. 2015;1318:61-7. doi: 10.1007/978-1-4939-2742-5_6. PMID: 26160564.

Lin AV. Indirect ELISA. Methods Mol Biol. 2015;1318:51-9. doi: 10.1007/978-1-4939-2742-5_5. PMID: 26160563.

Guo M, Du S, Lai L, Wu W, Huang X, Li A, Li H, Li C, Wang Q, Sun L, Liu T, Tian T, Wang S, Liang M, Li D, Xie C, Li J. Development and evaluation of recombinant E2 protein based IgM capture enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and double antigen sandwich ELISA for detection of antibodies to Chikungunya virus. PLoS Negl Trop Dis. 2022 Dec 8;16(12):e0010829. doi: 10.1371/journal.pntd.0010829. PMID: 36480572; PMCID: PMC9767333.

Kohl TO, Ascoli CA. Direct Competitive Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA). Cold Spring Harb Protoc. 2017 Jul 5;2017(7):pdb.prot093740. doi: 10.1101/pdb.prot093740. PMID: 28679705.





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